项目方案
1、以佐脲霉毒素(STZ)65mg/kg一次性经腹腔注射建立糖尿病PDN模型30只。
(1)血糖测定:SD雄性大鼠30只,造模前利用von Frey法和热辐射测量大鼠50%机械缩足反应阈(MWT)
和热缩足反应潜伏期(TWL),记录基础值:体重、MWT、TWL、血糖值。选取5只大鼠作为对照,其余
25只隔夜禁食后接受佐脲霉菌素(STZ)65mg/kg腹腔注射造模,于造模第三天测量血糖,大于
16.7mmol/L入组,非糖尿病大鼠退出实验。大鼠饲养注意:(1)造模前大鼠周龄为6~8周,体重应达到
200g以上,以保持其良好的营养状态及较强的抵抗力。(2)STZ要求保存在-20℃冰箱里,因其水溶液及
其不稳定,故配置时应将其加入0.1mol/L的枸橼酸缓冲液中,现配现用。配好的溶液应避光,低温放
置,10min内用完。(3)注射WTZ前大鼠应空腹12h以上,有文献报道,大鼠空腹注射STZ成膜率明显高
于非空腹组。(4)动物饲养密度不宜过大,并保持通风良好,每天至少通风2次,上下午各通风2h。
(5)因为造模成功后大鼠尿量明显增加,故每天应换2-3次垫料,以保持鼠笼清洁,干爽。(6)造模后大
鼠由于抵抗力较差,很容易由于实验室的温度或湿度的变化而诱发肺炎等疾病,甚至造成死亡,所以
尽量使实验室保持适宜、恒定的温度和湿度。(7)造模后大鼠需要较频繁的测量血糖,以往多采取眶静
脉或断尾法取血,此法对大鼠损害较大,且易合并感染,故建议采取尾静脉采血法测量血糖,并且要
特别注意采血部位的消毒,可以用碘伏每日消毒以避免感染。